什么是制备液相色谱仪?
制备型高效液相色谱仪通常都被认为和大容量色谱柱和高流速有关联的。然而并不是以设备的大小和系统消耗的流动相的多少来决定制备高效液相色谱,而是依据分离目的来决定。分析液相的目的是给一种组份进行定量和定性。制备液相的目的是对产品的单体进行提取和纯化。与传统的纯化方法(如蒸馏、萃取)比较,制备液相是一种更有效的分离方法,因此被广泛应用在样品和产品的提取和纯化上。随着合成、植化、生化和制药等领域对高纯度组份的需求不断增加,制备型液相色谱仪应用的领域也在迅速的扩大发展。
高效液相色谱(HPLC)是近30年发展起来的一种具有高灵敏度、高选择性的高效快速分离分析技术。它既能用于微量组分的分析测定,又能用于大量的制备分离,灵活多样,其应用范围已超过其他各种分离方法,尤其在中药样品的分析分离方面更充分发挥它的特长,为推动该领域的进步和发展作出了巨大贡献。
根据用途和泵配置的不同,一般可以将常见的实验室级别LC分为以下几种:分析型高效液相色谱仪(HPLC),半制备液相色谱仪(Semi-Prep HPLC)和制备型高效液相色谱仪(Prep-HPLC)以及中压液相色谱仪(MPLC)。这三者的原理基本一样,不同之处主要在于泵的最大流速,一般而言,分析型HPLC的最大流速为10.00mL/min,半制备HPLC为50mL/min,制备HPLC为100mL/min,中压液相色谱更高。而由于泵流速的升高,流通池的光程、体积,管道的内径,六通阀、定量环等零件也会相应改变;并且,根据实验室的需要,可以增加自动接收器等配件。
我们了解了液相色谱仪和制备型液相色谱仪的不同点,那么问题来了,制备型高效液相色谱仪在什么领域里最常用?
目前,实验室级别的制备液相色谱主要用于以下领域:
1.天然药物化学、中药化学。这是国内目前最广泛的使用方法,为了弄清楚植物中的微量有效成分,开放手工色谱柱早已不够用了,几乎每个搞天然药化的实验室都至少有一台液相,土豪实验室人手一台液相。
2.蛋白纯化。相对于前者,蛋白纯化的起步要稍微晚一点,但是发展很迅速。同时,由于外国仪器厂家在这个领域的优势不算太大,目前国内也在这个领域加快发展,抢占地盘。
3.药物杂质纯化。由于合成工艺并不能做到100%的产率,往往伴有副产品,如何获得微量的杂质并确定结构和含量,这就得靠液相色谱。
4.手性化合物的制备。这个主要是有机合成和方法学的在用。
总之,目前有机化学领域里,开放手工柱层析依然是最常用的分离手段,也是每个有机狗必会的技能之一,其在未来很长一段时间里将仍然扮演重要的角色。制备液相已经在天然药化领域大面积使用,在将来,随着科研的需要和价格的下降,将会逐渐进入千家万户,最终跟旋蒸一样普及。